在冯娟老师的指导下我们开展的DNA电泳实验。我们此次实验的目的是握DNA电泳技术的基本原理和应用,掌握DNA电泳实的基本操作和设备的使用并且能够处理和DNA电泳结果。
(1)电泳技术的基本原理和应用
首先DNA电泳的实现基于DNA的基本特性DNA分子的结构(双螺旋结构)DNA的电荷性质:负电荷(因磷酸基团)。DNA电泳的原理是一种利用电场使带电粒子按其电荷、大小、形状等特性进行分离。在DNA电泳中,DNA分子因带负电荷在电场中朝着正极迁移。
(2)DNA电泳基本操作
1. 准备所需材料:如DNA样品、电泳缓冲液(TBE或TAE缓冲液)、DNA标记物(如DNA Marker,DNA Ladder)、荧光染料(如EB染料或SYBR Green)等。
2. 所需器材设备:紫外灯照射装置(用于查看染色后的DNA)、微量移液器、塑料手套、电泳槽等。
3. 琼脂糖凝胶制备:配制琼脂糖溶液(0.7%-2%):取0.1g琼脂糖+10ml 1*TAE;加热溶解琼脂糖(分次加热),待琼脂糖全部融化后,冷却至60摄氏度后倒入制胶板中,加入1滴染料混匀(注意不要太剧烈,染料有一定的毒性,注意防护)放置凝胶梳,凝胶固化。
4. 点样及跑胶 :先将凝胶放置电泳槽中然后加入500ml 1*TAE缓冲液,随后用微量移液枪移取样品进行点样,最后打开电泳仪电源,(注意接线柱接线:红对红、黑对黑)。
(3)DNA电泳结果
带上手套拿取凝胶将其放置紫外灯台进行观察及拍照。
(4)总结与思考
DNA电泳技术对我们分离和纯化DNA具有重大意义,通过DNA电泳我们可已将混合DNA样品的个个片段分开以进行更加深入的纯化和分析并且其操作简单,成本较低适合大规模样本处理。通过此次实验我们对DNA技术有了更深入和全面的了解使我们受益颇多。在点样、跑胶的过程中我们也学会了更多操作方面的技巧和细节,我们明白人生是在不断的学习和实践中得以完善的,今后我们会牢记此次实验给我们带来的经历和感悟在人生的道路上继续前行。
图文来源:药品23-1刘超骏